TG1 Chemically Competent Cell

基因型：

F′ traD36 proAB lacIqZΔM15]supE thi-1Δ(lacproAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)

簡要說明：

TG1來源于E. coli K-12菌株，是目前生長速度最快的克隆用大腸桿菌菌株，在平板上37℃，7h可見克隆。主要的噬菌體展示用菌株，同時也可用于普通質粒的構建，lacIqZΔM15的存在使其可以用于藍白斑篩選等實驗；但不含核酸酶endA1突變，體內核酸酶含量較高，提取質粒時推薦使用質粒提取試劑盒中去蛋白液以去除菌體內大量的核酸酶。High5TM系列TG1感受態(tài)細胞經特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率>1×109cfu/μg。

操作說明：

1.TG1感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。 

2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。 

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。 

4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

注意事項：

1. 感受態(tài)細胞最好在冰上融化。冰上放置大約5分鐘即可融化，融化后8分鐘內加入質粒，否則會影響轉化效率。 

2.混入質粒或連接產物時應輕柔操作。 

3.轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。